• Anti-CD3 antibody의 자극과 IL-2 존재하에서 T cell의 높은 증식율 유지
• 혈청을 첨가하지 않아도 높은 성장성 유지 가능
• 동물 유래 성분을 포함하지 않는 Xeno-Free 배지
  (Human serum albumin (pharmaceutical-grade) 및 recombinant human insulin 포함)
• Endotoxin 검사완료 (endotoxin 0.3 EU/㎖ 이하) 및 mycoplasma, 무균 시험 완료

제품설명

LymphoONE™ T-Cell Expansion Xeno-Free Medium은 human T cell의 확대 배양뿐만 아니라, retrovirus vector, lentivirus vector를 T cell에 유전자 도입하는 경우에도 최적의 배지이다. （배지에는 Human serum albumin (pharmaceutical-grade) 및 recombinant human insulin 이외의 단백질은 첨가되지 않았고, cell 배양에 그대로 사용 가능하며 혈청, 혈장을 첨가하는 경우 세포 증식률을 더 높일 수 있다.
T cell은 Anti-CD3 mAb GMP grade (Code T210) stimulation 후, cytokine (IL-2, IL-5 등)을 포함한 LymphoONE™ T-Cell Expansion Xeno-Free Medium을 이용하여 배양함으로써 증식시킬 수 있다. Anti-CD3 antibody를 이용한 stimulation 시 RetroNectin^®을 동시에 사용함으로써 T cell 확대배양 효율을 높일 수 있다.
이와 같이 확대 배양된 T cell 집단에서는 Anti-CD3 antibody 단독으로 사용했을 때 보다 naive T cell의 비율이높은 것으로 보고되고 있다 (참고 문헌: Hosoi et al. 2014).
Cell을 확대 배양하기 위한 배양 용기로는 세포 배양용 플라스크, plate 외에 가스 투과성 culture bag인 CultiLife™ 215 Culture bag (Code FU0005)를 이용한 완전 폐쇄계 배양이 가능하다.
RetroNectin^®을 이용한 T cell 확대배양 방법 및 예는 아래의 페이지를 참고 바랍니다.

• Application - RetroNectin^®을 이용한 T-cell 확대배양 (링크)
• 참고 문헌: Stimulation through very late antigen-4 and-5 improves the multifunctionality and memory formation of CD8＋T cells. (Hosoi H,et alet al., (2014) Eur J immunol.44:1747-1758)
• FAQs - LymphoONE™ T-Cell Expansion Xeno-Free Medium (링크)

[LymphoONE™ T-Cell Expansion Xeno-Free Medium]

T cell 확대배양 사용 예

1. T cell의 확대 배양의 배지 성능의 비교
[방법]
2명의 공여자*에서 채취한 혈액에서 Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) 및 혈장을 분리하여, PBMC를 Anti-CD3 mAb가 포함된 CultiLife 215 Culture bag에서 stimulation하며 4일간 배양 후, IL-2를 포함한 다양한 림프구 배양용 배지에서 적당히 희석하며 10일간 배양하였다.
* 실험내용을 고지 후 동의를 얻어 샘플을 채취하였습니다.

[결과]


LymphoONE™ T-Cell Expansion Xeno-Free Medium은 혈청 (human AB serum) 을 첨가하지 않은 배양 조건에서도 매우 높은 확대배양률을 보였고, 기존 제품보다도 PBMC 증식 능력이 우수한 것으로 확인되었다.

2. RetroNectin^® co-stimulation에 의한 T cell 확대배양 예
[방법]
Peripheral blood mononuclear cells (PBMC)를 Anti-CD3 mAb와 RetroNectin^®이 모두 포함된 CultiLife™ 215 Culture bag에서 co-stimulation하며 4일간 배양 후, IL-2를 포함한 림프구 배양용 배지에서 혈청 (human AB serum)의 포함 또는 미포함 조건으로 10일간 배양하였다.
혈청 첨가 조건으로 Day 0~Day 7은 1%의 혈청을 포함, Day 7~Day 10은 0.5%의 혈청을 포함하는 조건에서 배양하였다.

[결과]

혈청 (Human AB serum)을 첨가하지 않은 배양 조건에서도 매우 높은 확대 배양률을 보였고, 확대 배양된 T cell 중에는 naive T cell의 비율이 타사배지 대비 높은 것을 확인하였다.

보존 2~8℃

Reference