Real Time PCR normalization & primer set
Real Time PCR normalization
´ÙÄ«¶ó¿¡¼´Â ´Ù¾çÇÑ Á¶Á÷¿¡¼ À¯·¡ÇÑ reference RNA¿Í cDNA¸¦ ÆǸÅÇÏ°í ÀÖ¾î ´Ù¾çÇÑ Real Time PCR ½ÇÇè¿¡ ÀÌ¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
Real Time PCR Áß ¸ñÀûÀ¯ÀüÀÚÀÇ ¹ßÇö·®À» reference geneÀÇ ¹ßÇö·®À¸·Î º¸Á¤ÇÏ¿© »ó´ëÀûÀÎ Á¤·®°ªÀ» »êÃâÇÏ´Â ¹æ¹ýÀÌ ³Î¸® »ç¿ëµÈ´Ù (»ó´ë Á¤·®¹ý). ÀÌ °æ¿ì house keeping geneÀ» reference geneÀ¸·Î
ÁÖ·Î »ç¿ëÇÏÁö¸¸, house keeping geneÀÇ ¼±Á¤ÀÌ ¾î·Á¿î °æ¿ì, ´ë½Å external RNA¸¦ ½ÇÇè¿¡ ÷°¡ÇÏ¿© reference geneÀ¸·Î ´ëüÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
´ÙÄ«¶ó¿¡¼´Â Real Time RT-PCRÀ» À§ÇÑ external RNA¿Í dilution solution, °ËÃâ¿ë primer set·Î ±¸¼ºµÈ
External Standard Kit (Lambda PolyA) for qPCR (Code 3789)¸¦ ÆǸÅÇÏ°í ÀÖ´Ù.
¥ë DNA¸¦ ÁÖÇüÀ¸·Î
in vitro transcription¿¡¼ ÇÕ¼ºÇÑ ¾à 1.0 kbÀÇ RNA (poly A°¡ Æ÷ÇÔ)¸¦ Æ÷ÇÔÇÏ´Â
º» Á¦Ç°Àº eukaryotic gene ¹ßÇö ¿¬±¸¿¡ external reference·Î »ç¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
ÇÔ²² Æ÷ÇԵǾî ÀÖ´Â EASY Dilution (for Real Time PCR) (º°µµ ±¸¸Å½Ã Code 9160)Àº total RNA³ª cDNA¸¦ ´Ü°è Èñ¼® (serial dilution)ÇÒ ¶§ Èñ¼®¿ë¾×À¸·Î »ç¿ëÇÑ´Ù. H2O³ª TE buffer¸¦ »ç¿ëÇßÀ» ¶§º¸´Ù
Àú³óµµ±îÁö Á¤È®ÇÏ°Ô Èñ¼®ÇÒ ¼ö ÀÖ°í, ¿ªÀü»ç ¹ÝÀÀÀ̳ª PCRÀÇ ¹ÝÀÀ¼º¿¡ ¿µÇâÀ» ¹ÌÄ¡Áö ¾ÊÀ¸¹Ç·Î Èñ¼®ÇÑ ÁÖÇü ¿ë¾×À» ±×´ë·Î ¿ªÀü»ç ¹ÝÀÀÀ̳ª PCR ¹ÝÀÀ¿¡ »ç¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
Real Time PCR primer sets
PrimerArray Disease½Ã¸®Áî´Â ¾Ï, ´ç´¢º´, õ½Ä µî Áúȯ¿¡ °ü·ÃµÈ human ¶Ç´Â mouse À¯ÀüÀÚ ¹ßÇö Çؼ®À» À§ÇÑ Real Time RT-PCR¿ë primer setÀÌ´Ù. °¢°¢ 88Á¾ÀÇ °ü·Ã À¯ÀüÀÚ¿Í 8Á¾ÀÇ house keeping geneÀÇ °ËÃâÀ» À§ÇÑ primer°¡ Æ÷ÇԵǾî ÀÖ¾î, »ó´ëÁ¤·®¹ýÀ» ÀÌ¿ëÇÑ »ùÇà °£ À¯ÀüÀÚ ¹ßÇö º¯È¸¦ ½ºÅ©¸®´×ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
°¢ Primer set´Â Real Time RT-PCR¿¡ ¾çÈ£ÇÏ°Ô ÁõÆøµÊÀ» È®ÀÎÇÏ¿´°í, PrimerArray Analysis Tool Ver.2.2*¶Ç´Â Multiplate RQ*·Î Çؼ®ÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸ç, °¢°¢ÀÇ primer¸¦ º°µµ ±¸ÀÔÇÏ¿© ¹ßÇöº¯È°¡ È®ÀÎµÈ À¯ÀüÀÚ¿¡ ´ëÇÑ Ãß°¡ ½ÇÇèÀ» ÁøÇàÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
*Çؼ®À» À§ÇÑ ÇÁ·Î±×·¥Àº ´ÙÄ«¶óÄÚ¸®¾Æ °í°´Áö¿ø¼¾ÅÍ·Î ¹®ÀÇ ¹Ù¶ø´Ï´Ù. T: 02-2081-2510,
[email protected]
PrimerArray Á¦Ç°¶óÀÎ ¹× Primer ¸®½ºÆ®
*¸µÅ©¸¦ Ŭ¸¯ÇÏ¸é ¿¢¼¿ÆÄÀÏÀ» ÅëÇØ °¢ Á¦Ç°º° Primer ¸®½ºÆ®¸¦ È®ÀÎÇÏ½Ç ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.