Á¦Ç°¼³¸í
»ì¸ð³×¶ó±ÕÀº ´ëÀå±ÕÀ̳ª Àû¸®±Õ°ú °°Àº ±×·ì¿¡ ¼ÓÇÏ´Â ¼¼±ÕÀ¸·Î, ÀÚ¿¬°è¿¡ ³Ð°Ô ºÐÆ÷ÇÏ°í ÀÖÀ¸¸ç, ¾à 2,500Á¾·ù ÀÌ»óÀÇ Ç÷ûÇüÀÌ ¾Ë·ÁÁ® ÀÖ´Ù. ÇöÀç ÀÌ Áß¿¡¼µµ ƯÈ÷,
Salmonella Enteritidis¿¡ ÀÇÇÑ ½ÄÁßµ¶ÀÌ ±Þ°ÝÇÏ°Ô Áõ°¡ÇÏ°í ÀÖ´Ù. º» Á¦Ç°Àº ´ëºÎºÐÀÇ »ì¸ð³Ú¶ó±ÕÀÌ º¸À¯ÇÏ°í ÀÖ´Â À¯ÀüÀÚÀÇ ÇϳªÀΠħÀÔ¼º ÀÎÀÚ°ü·Ã
À¯ÀüÀÚ invA¸¦ Real Time PCR ÀåÄ¡¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© °ËÃâÇÑ´Ù.
Hot Start PCR¿ë È¿¼ÒÀÎ TaKaRa Ex Taq HS¸¦ »ç¿ëÇÏ¿©, primerÀÇ misprimingÀ̳ª primer dimer À¯·¡ÀÇ ºñƯÀÌÀûÀÎ ÁõÆøÀ» ¸·À» ¼ö°¡ ÀÖ¾î °í°¨µµ °ËÃâÀÌ °¡´ÉÇÏ´Ù. ÁõÆø»ê¹°ÀÇ °ËÃâ¿¡´Â Cycling probe¹ýÀ» »ç¿ëÇÏ°í ÀÖ´Ù.
º» Á¦Ç°¿¡´Â »ì¸ð³×¶ó±ÕÀÇ Ä§ÀÔ¼º ÀÎÀÚ°ü·Ã À¯ÀüÀÚ invA °ËÃâ¿ë FAM Ç¥½Ä probe, internal control ¹× internal control °ËÃâ¿ë ROX Ç¥½Ä probe°¡ Æ÷ÇԵǾî ÀÖ´Ù.
µÎ ÆÄÀåÀ» µ¿½Ã¿¡ ¸ð´ÏÅ͸µ ÇÔÀ¸·Î¼ ÇϳªÀÇ tube¿¡¼ invA À¯ÀüÀÚÀÇ °ËÃâ°ú internal control DNAÀÇ °ËÃâ¿¡ ÀÇÇÑ false negative reactionÀ» È®ÀÎÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.
¶ÇÇÑ Ver 2.2Àº ±âÁ¸ Á¦Ç°ÀÇ °¢ ±¸¼ºÇ°À» premixÈÇÏ¿© Æí¸®¼ºÀ» ³ô¿´´Ù.
<ÁÖÀÇ>
º» Á¦Ç°Àº ÀϺΠ»ç¾çÀ» ¾÷±×·¹À̵åÇϸç Lot. AK701 Á¦Ç°ºÎÅÍ Smart Cycler II System (Cepheid)ÀÇ »ç¿ëÀ» ±ÇÀåÇÏÁö ¾Ê½À´Ï´Ù.
Thermal Cycler Dice Real Time System°ú Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific) µî ±â±â »ç¿ëÀ» ÃßõÇÕ´Ï´Ù.
³»¿ë (50ȸ; 25 §¡ ¹ÝÀÀ ½Ã)
¡¡ |
|
±¸¼ºÇ°¸í |
¿ë·® |
¡Ü |
1. |
2¡¿Cycleave Reaction Mixture (2¡¿conc.) |
625 §¡ |
¡Ü |
2. |
SIN Primer/Probe Mix (FAM, ROX)* (5¡¿conc.) |
250 §¡ |
¡Û |
3. |
dH2O |
1 §¢ |
¡Ü |
4. |
SIN Positive Control |
150 §¡ (30ȸ ºÐ) |
* Fluorescent-labeled probe¸¦ Æ÷ÇÔÇϹǷÎ, Â÷±¤¿¡ ÁÖÀÇÇÒ °Í.
ÇÁ¶óÀ̸Ӵ SHIMADZU CORPORATION¿¡¼ Á¦Á¶
º¸Á¸ -20¡É
Primer Á¤º¸
Primer¸í |
ÁõÆø »çÀÌÁî
(Ÿ°Ù) |
ÁõÆø »çÀÌÁî
(ÀÎÅͳΠÄÁÆ®·Ñ) |
SIN1/SIN2 |
378 bp |
122 bp |